安捷伦Seahorse XF细胞线粒体压力测试尝试成果剖析
Seahorse XF神经细胞线粒体气压测试英文成功灵活运用XF调节器器检测器板预置的加量孔,在试用历程中尽早将呼气作用的慢慢调理剂插足人体细胞孔中,导致赢得表示线粒体药用价值的关头技术指标,涉及到:线粒体几乎呼气、ATP引发洽谈干系正常透气、极大正常透气、备用电源正常透气才可和非线粒体正常透气等。
选择介绍:
试再生利用的调整剂为寡霉素 (Oligomycin)、羰基氰-4 (三氟甲氧基)苯腙(Carbonyl cyanide-4(trifluoromethoxy) Phenylhydrazone, FCCP)、鱼藤酮 (Rotenone)和抗霉素A (Antimycin A)。
Oligomycin是ATP合酶(软型物V)按奈剂,它关系或降低沿途历程ETC的网络流,迫使线粒体呼吸系统或OCR缩减。缩减的OCR与内部ATP的进行相干。
FCCP是解偶联剂,它能够 可能可能粉碎性质子梯度方向和线粒体膜电极电位,干预后经途程序运行ETC的网络流易受一定使挽回物IV耗氧率触达上限。FCCP提起的OCR也可以来较劲备品呼入的方可。备品呼入的方可是平衡肿瘤细胞对彰显的养分还要或各种压力的投诉方可。
Rotenone是复合型物I的抑制剂,Antimycin A是和好物III的按奈剂,它是整合半封闭了线粒体深吸气道,所以不错说不定说不定比较由线粒身体外的流程控制的非线粒体深吸气道耗氧。
来尝试成功含义:
关键吸(Basal respiration):用到知足人体细胞ATP还要和线粒肤质子渗漏的氧耗损,情况组织细胞在本质上目的下的势能还要。
ATP出现(ATP Production):插足ATP合酶按奈剂寡霉素后压减的氧气罐耗损快慢,表示真正呼吸道中被拿来带动ATP会出现的位置,表现形式用作知足组织细胞热量需要的线粒体ATP造成。
H+(质子)渗漏(H+ (Proton) leak):与ATP发生不偶联的更本喘气的残剩线条,质子渗漏都可以即使即使被看作是线粒体毁伤的标志,也可被看作是种調理线粒ATP情况的系统。
最主要呼入的(Maximal respiration):插足解偶联剂FCCP后后达到的最大化二氧化碳耗损效率。FCCP通过过程中安抚气息链以更大才能够正常运作摹拟心理上的 “电量须要”,使得底物(糖、皮脂和氨基酸等)的急速氧化反应以回应这些分解代谢挑衅,重量显示人体细胞不错如果你如果你去往的最明显正常呼吸进程。
备用电源呼气才行(Spare respiratory capacity):此仗量最终个人目标表現神经生殖人体癌细胞回复能力想要的才会和神经生殖人体癌细胞呼吸道与他现场最高值的相互影响,神经生殖人体癌细胞回复能力想要的才会用于为神经生殖人体癌细胞历史潮流性或矫捷性的一两个最终个人目标。
非线粒体心脏跳动(Nonmitochondrial respiration):干预鱼藤酮和抗霉素A后,正是因为一把部人体细胞中的酶一直耗损氧而存留的氧耗损,这对线粒体口呼吸的精确度高测量较重要。
试过技术成果在乎公式计算:
Seahorse XF组织细胞核线粒体负担测试软件是勘界组织细胞核线粒体功用的金国家标准,提供了可以的线粒体分解代谢转化功用的现象,揭开用根本就分解代谢转化旋光度的测定不了了提供的关头图片信息及统计数据。
声明函:仅限专题会运用,不需要于原因性操作。
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